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小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: FⅧ ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時(shí)檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

FN    重組人 Fibronectin / Fibronectin Fragment 2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    FN
AHSG    重組人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 蛋白 (His 標(biāo)簽)    AHSG
FAS    重組人 FAS / CD95 / APO- / TNFRSF6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    FAS
ESAM    重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白    ESAM
ESAM    重組人 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    ESAM
ERBB4    重組人 HER4 / ErbB4 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)    ERBB4
ERBB3    重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    ERBB3
EPOR    重組人 EPOR / Erythropoietin Receptor 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    EPOR
EFNA5    重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    EFNA5
EFNA3    重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)    EFNA3
EFNA3    重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白    EFNA3
EPHB6    重組人 EphB6 / EphB6 蛋白    EPHB6
EPHB6    重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    EPHB640387-0    EGY48 酵母感受態(tài)細(xì)胞    0×00μL
胸嘧啶    5g    
核酸外切酶 III    2500U    
異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷    g    
TCEP 鹽酸膦    g    
CAS950-62-2    D- 半乳糖醛酸    g
0083-250    干粉型 SOB 培養(yǎng)基    250g
小鼠Ⅷ(FⅧ)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格一站式平末端克隆試劑盒    20 次    
堿性磷酸酶 ( 牛小腸 )    mg    
3,5 二硝基水楊酸    25g    
山羊抗人 IgG(H+L),堿性磷酸酶標(biāo)記    00μL    
CAS493-52-7    甲基紅    5g
30573-00    小鼠抗 His 標(biāo)簽單抗    00μL
脂蛋白純化試劑盒    50 次    
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix    00 次    

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