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小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: GR-α ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行。
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

CDB    重組人 CDB / CDA 蛋白 (Fc 標簽)    pUC9 DNA/MspI (HpaII) Marker
SIGLEC5    重組人 SIGLEC5 蛋白 (Fc 標簽)    pUC9 DNA/MspI (HpaII) Marker, ready-to-use
CD    重組人 CD 蛋白 (GST 標簽)    Lambda Mix Marker
AGER    重組人 AGER / RAGE 蛋白    GeneRuler? 00 bp DNA Ladder
NRG    重組人 NRG-beta 蛋白 (ECD, Fc 標簽)    GeneRuler? 00 bp DNA Ladder
STK40    重組人 STK40 蛋白 (His & GST 標簽)    GeneRuler? 00 bp DNA Ladder, ready-to-use
NLK    重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標簽)    GeneRuler? 00 bp DNA Ladder, ready-to-use
ENPP5    重組人 ENPP5 蛋白 (His 標簽)    ΦX74 DNA/BsuRI (HaeIII) Marker
IL36A    重組人 ILF6 / IL36 蛋白 (aa 6-58)    ΦX74 DNA/BsuRI (HaeIII) Marker
ANGPTL4    重組人 ANGPTL4 蛋白 (Fc 標簽)    ΦX74 DNA/BsuRI (HaeIII) Marker, ready-to-use
FCGR2A    重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (67 Arg, His 標簽)    pBR322 DNA/BsuRI (HaeIII) Marker
IL36G    重組人 IL36G / ILF9 蛋白 (aa 8-69)    Lambda DNA/EcoRI Marker5- 溴 -2'- 脫氧尿苷    00mg    
DMEM( 低糖 )    0L    
CAS69-89-6    黃嘌    g
2-0070-5     骨骼肌細胞生長因子    5mL
902-50    柱式骨骼 DNAout    50 次
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格RecA 蛋白    000μg     
DEAE 瓊脂糖凝膠 6B    25mL    
96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )    5次    
核酸內(nèi)切酶 III (Nth)    000U    
CAS6443-96-5    ,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷    5g
2-269    KM7 酵母菌種    mL
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )    25 T    
克必隆 eTS cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒    套    

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