細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

ECV-304人膀胱癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞特性

1）來(lái)源：人膀胱

2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼璧生長(zhǎng)

3）含量：>1x106細(xì)胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5）用途：僅供科研使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

干擾素α4(IFNα4)重組蛋白 Recombinant Interferon Alpha 4 (IFNa4)

HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

SMAD5重組小鼠 Smad5 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FCGR3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD16 / FCGR3 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated

GPD1重組人 GPD1 / Glycerolphosphate Dehydrogenase 1 蛋白 Protein

PRDX5重組小鼠 Peroxiredoxin 5 / PRDX5 蛋白 Protein

V-Rel網(wǎng)狀內(nèi)皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)重組蛋白 Recombinant V-Rel Reticuloendotheliosis Viral Oncogene Homolog A (RELA)

RAMP3重組人 RAMP3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HSPD1 Protein Human 重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

BTLA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠CD8分子(CD8)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠(Pepsin)檢測(cè)試劑盒

Humancatecholamine,CAELISAKit 人兒茶酚胺(CA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCompleme1q,C1q檢測(cè)試劑盒人補(bǔ)體1q(C1q)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

ECV-304人膀胱癌細(xì)胞兔骨橋素(OPN)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔鉤端IgG(Lebtospira)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔兒茶酚胺(CA)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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CLIAKitfom-1(MouseKidneyinjurymolecule1)ELISAKIT小鼠腎損傷分子1

通用型蛋白電泳考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒10次

ELISAKitTGF-α大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α