細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

ACHN人腎細(xì)胞癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱；ACHN；人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞

種屬來源；人

年齡性別；男；22歲

組織來源；腎細(xì)胞腺癌，胸水轉(zhuǎn)移灶

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；ACHN細(xì)胞1979年建系，源自一名22歲患有腎細(xì)胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細(xì)胞的生長，該細(xì)胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。

STR位點信息；Amelogenin：X；CSF1PO：11；D13S317：12；D16S539：12，13；D18S51：16；D19S433：14，15；D21S11：30；

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

二氫轉(zhuǎn)乙?；?/span>(DLAT)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL13重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 Protein

CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白

NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白  Protein

ST6GAL1重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)重組蛋白 Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)

CRELD1重組人 CRELD1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDGFB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白

豬補體片斷3b(C3b)ELISA 試劑盒

Human Legionella aibody IgG (LP Ab-IgG) ELISA Kit 人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)檢測試劑盒

Porcinediamineoxidase,DAOELISAKit 豬氧化酶(DAO)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforALOX-5(Humanarachidonate5-lipoxygenase)ELISAKit人花生四烯酸5脂加氧酶

血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

Mouseαmannosidase,αManaseELISAKit小鼠α甘露糖苷酶(αManase)檢測試劑盒

ACHN人腎細(xì)胞癌細(xì)胞中文名稱   方法   規(guī)格

小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISAKit   ELISA.  

小鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISAKit   ELISA.  

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISAKit   ELISA.

大鼠甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)絲酸蛋白酶1(MASP1)檢測試劑盒 ，英文名： MASP1 ELISA Kit

Rat alpha glathione S ansferase (-GST) ELISA Kit 大鼠αS轉(zhuǎn)移酶(α-GST)檢測試劑盒

Rateosinophilchemotacticfactor,ECFELISAKit 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforE(Mouseesogen)ELISAKit小鼠雌激素

細(xì)胞培養(yǎng)污染性支原體屬(Mycoplasma)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次

RatImmunoglobulinA,IgAELISAKit大鼠免疫球蛋白A(IgA)檢測試劑盒