細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。

BT-B人宮頸癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞說明

該株細(xì)胞DNA分型在細(xì)胞系檢索中找到匹配的細(xì)胞系，DSMZ數(shù)據(jù)庫顯示細(xì)胞名為BT-B，細(xì)胞號對應(yīng)227，Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=26116706).

細(xì)胞STR位點信息：D5S818：11，12；D13S317：13.3，13.3；D7S820：8，12；D16S539：9，10;VWA :16,18；TH01：7，7；AMEL：X,X; TPOX :8,12; CSF

參考資料(來源文獻(xiàn))

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細(xì)胞凍存

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠糖原0酸化酶B(PYGB)檢測試劑盒 ，英文名： PYGB ELISA Kit

Mouse carbonic anhydrase (CA) ELISA Kit 小鼠酶(CA)檢測試劑盒

RatAndrostenedione,ASDELISAKit 大鼠雄(ASD)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHNP1-3(Humanneuophilpeptide1-3)ELISAKit人中性粒細(xì)胞防御素1-3

細(xì)胞PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitFlt3L大鼠FMS樣酪激酶3配體

GFP重組水母 GFP 蛋白 Protein

TRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 0.5mgTRAIL/Apo2L (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) 壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體/凋亡素2配體抗原

AMICA1重組人 JAML / AMICA 蛋白 Protein

GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白

IL32 Protein Human 重組人 Interleukin-32 / IL-32 蛋白 (isoform alpha, His 標(biāo)簽)

PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase 0.5mgPLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 型纖溶酶原激活因子(多肽)

GFER Protein Human 重組人 GFER / ALR 蛋白

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

FGF1 Protein Human 重組人 aFGF / FGF1 蛋白

CDK1重組人 CDC2 Kinase / CDK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

BT-B人宮頸癌細(xì)胞小鼠白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat heat shock protein 96 (HSP gp96) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)檢測試劑盒

Humaniegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit 人整合素連接激酶1(ILK-1)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCalreticulin,C檢測試劑盒人鈣網(wǎng)蛋白(C)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞克隆凍存試劑盒50次

Humansolubleierleukin-1receptorⅡ，IL-1sRⅡELISAKit人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子免疫球蛋白E(IgE)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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