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HCE-T人角膜上皮細(xì)胞；HCE-T
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
HCE-T人角膜上皮細(xì)胞；HCE-T正在出售的產(chǎn)品：表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 IZUMO1 Others Human 人 IZUMO1 人細(xì)胞裂解液 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
HCE-T人角膜上皮細(xì)胞；HCE-T
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱；HCE-T ；人角膜上皮細(xì)胞
種屬來源；人
組織來源；角膜
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
背景簡介；該細(xì)胞系源自一名49歲女性角膜組織建立，通過SV40-Adeno 載體轉(zhuǎn)化角膜細(xì)胞。64kD 角蛋白產(chǎn)生
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測；無
培養(yǎng)基；DMEM/F12+ 15% FBS+ 5μg/mL Insulin + 10ng/mL EGF＋1% PS
培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子(EMMPRIN)檢測試劑盒 ，英文名： EMMPRIN ELISA Kit
Mouse neuropeptide Y (NP-Y) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測試劑盒
MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSP-90(MouseHeatShockProtein90)ELISAKit小鼠熱休克蛋白90
細(xì)胞JNK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-2sRβ大鼠白介素2可溶性受體β鏈
NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
DPEP1 Protein Human 重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白
CHI3L1 Protein Mouse 重組小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白
IL-2 (Interleukin-2 0.5mgIL-2 (Interleukin-2)Mouse、Ret 白介素2抗原(大、小鼠)
DPEP1 Protein Human 重組人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 蛋白
NRP1重組食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 Protein
CHI3L1 Protein Mouse 重組小鼠 CHI3L1 / YKL40 / gp39 蛋白
PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
HCE-T人角膜上皮細(xì)胞；HCE-T小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human noradrenaline (NA) ELISA Kit 人去甲(NA)檢測試劑盒
HumanFibrinELISAKit 人血纖蛋白(Fibrin)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanamiodarone,AD檢測試劑盒人呋同(AD)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次
MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit猴γ干擾素(IFN-γ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨形成蛋白(BMPs)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
