細胞處理：

1） 凍存細胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。

小鼠結(jié)締組織L細胞株；A9

商品屬性

商品介紹

細胞別稱：A9; A9 (Hamprecht); A9(Hamprecht); AG 9; GM00346; GM-346; GM346

種屬來源：小鼠

年齡性別：雄；100日齡

組織來源：皮下結(jié)締組織；疏松結(jié)締組織和脂肪；正常

生長特性：貼壁生長

細胞形態(tài)：成纖維細胞樣

背景簡介：A9細胞是從野生型細胞株L中分離得到的。A9細胞對HAT選擇培養(yǎng)基：敏感，并缺失了腺苷轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶與次轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶；A9細胞對8-氮(0.003mg/ml)和6-硫代(0.1mM)有抗性。

生物安全等級：1

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠軟骨糖蛋白39(GP39)檢測試劑盒 ，英文名： GP39 ELISA Kit

Mouse bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)檢測試劑盒

RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 大鼠脫輕表雄酮(DHEA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHAELISAKit大鼠透明質(zhì)酸

細胞半乳糖總含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein

Thymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1)

OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein

GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白

LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白

Thymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1  α-1 (-Thymosin alpha-1)

GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白

GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein

LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白

OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠結(jié)締組織L細胞株；A9小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T

People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三0酸(DP)檢測試劑盒

HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降鈣素(CT)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancarcinoembryonicaign,CEA檢測試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組腺病毒效價比色法定量檢測試劑盒50次

HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子巨噬細胞性蛋白1α檢測試劑盒   兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細胞性蛋白1α 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子抗中性粒細胞顆粒抗體檢測試劑盒   兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子抗中性粒細胞顆?？贵w試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆?？贵w檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子可溶性細胞間粘附分子1檢測試劑盒   兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細胞間粘附分子1 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

兔子可溶性血管細胞粘附分子1檢測試劑盒   兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性血管細胞粘附分子1 檢測試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。