HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 紡錘形細胞

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)方案A（默認）

生長培養(yǎng)基:

hCMEC/D3 細胞專用培養(yǎng)基（CM-0843）

培養(yǎng)條件:

氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:6

推薦換液頻率 2-3次/周

參考資料(來源文獻)

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤? cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。

b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素28B(IL-28B)檢測試劑盒 ，英文名： IL-28B ELISA Kit

Mouse ierleukin 8 (IL-8/CXCL8) ELISA Kit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)檢測試劑盒

ELISA 小鼠類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3(mouse IGBPF-3)  進口分裝

CLIAKitforIMA(HumanIschemiaModifiedAlbumin)ELISAKit人缺血修飾白蛋白

通用型胱(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitINH-B大鼠抑制素B

IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein

Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標(biāo)簽)

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)

Ghrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽 0.5mgGhrelin 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)多肽抗原

EPHA4 Protein Human 重組人 EphA4 / HEK8 蛋白 (aa 570-986, His & GST 標(biāo)簽)

IL21R重組大鼠 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 蛋白 Protein

FLT4 Protein Mouse 重組小鼠 VEGFR3 / FLT-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)

KLK8重組人 KLK-8 / Kallikrein-8 蛋白 Protein

HCMEC/D3永生化人腦微血管內(nèi)皮細胞小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human neuraminidase (NA) ELISA Kit 人神經(jīng)酶(NA)檢測試劑盒

HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISAKit 人類白細胞抗原E(HLA-E)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-hepatitisAvirusIgMaibody,ai-HAV檢測試劑盒人抗甲型肝病毒IgM抗體(ai-HAV)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸葡萄糖酸脫氫酶(phosphogluconatedehydrogenase;PGD)電泳分析試劑盒5次

Humanverylowdensitylipoproteieceptor,VLDLRELISAKit人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠胃泌素(mouse Gasin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進口分裝

細胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。     收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。