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 ELISA常用方法對比

我們知道，ELISA可分為多種類型測定，是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。 我公司技術(shù)部將各種ELISA常用方法的優(yōu)勢劣勢進(jìn)行對比，結(jié)果如下：

一、間接法：此測定方法與直接法類似，差別在于一級(jí)抗體沒有酶標(biāo)記，改用酶標(biāo)記的二級(jí)抗體去辨識(shí)一級(jí)抗體來測定抗原量。

優(yōu)勢：二抗可以加強(qiáng)信號(hào)，而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級(jí)抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。

劣勢：交互反應(yīng)發(fā)生的機(jī)率較高。

二、雙抗體夾心法：被檢測的抗原包被在兩個(gè)抗體之間，其中一個(gè)抗體將抗原固定于固相載體上，即捕捉抗體。另一個(gè)則是檢測抗體，此抗體可用酶標(biāo)記后直接測定抗原的量；或不標(biāo)記，再透過酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取，才可避免交互反應(yīng)或競爭相同的抗原結(jié)合部位。

優(yōu)勢：高靈敏、高專一性，抗原無須事先純化。

劣勢：抗原一定得擁有兩個(gè)以上的抗體結(jié)合部位。

三、直接法：將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。

優(yōu)勢：操作手續(xù)簡短，因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。

劣勢：試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記，但不是每種抗體都適合做標(biāo)記，費(fèi)用相對提高。